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　　基于纳米限制效应的固态比率荧光适配体传感器，用于复杂基质中17β-雌二醇的检测

　　在精准畜牧业中，对17β-雌二醇（E2）进行精确的定量监测对于生殖管理至关重要。然而，由于基质带来的背景干扰以及信号波动，要在复杂的生物样本中测定E2仍然具有挑战性。为此，我们开发了一种基于纳米限制技术的固态比率荧光适配体传感器，该传感器结合了目标诱导链位移技术、磁分离技术以及阳极氧化铝纳米通道限制技术。该传感探针由包覆有链霉亲和素的多功能磁性纳米颗粒构成，这些纳米颗粒上负载有FAM标记的cDNA内参以及Texas Red标记的E2适配体报告分子。当E2与探针结合后，会促使Texas Red标记的适配体从磁性探针上解离。通过磁分离和洗涤可减少可溶性基质带来的干扰，而将传感复合物沉积在阳极氧化铝膜上则能降低咖啡永利集团科技有限公司环效应带来的不均匀性，从而实现更均匀的双色荧光分布，便于比率分析。在与样本基质匹配的校准条件下，该传感器在自来水及母猪唾液中的检测线 pM，在全乳中的检测范围为5.0–40.0 pM，在发情后期母猪尿液中的检测范围为5.0–15.0 pM。在自来水中，该传感器的检测下限为3.62 pM。不同基质下的校准斜率存在差异，这表明仍存在基质相关的干扰因素，因此进行针对特定基质的校准才是实现定量分析的关键。在所研究的各类基质中，加标回收率介于86.92%至119.54%之间。在该传感器所检测的所有化合物中，其对17β-E2的反应最为强烈；不过，其对E3的交叉反应率为77.3%，对17α-E2的交叉反应率为47.3%，这说明该传感器是对目标物质有选择性识别，但并非完全专一识别。分子对接分析推测出了可能的结合姿态，但尚未通过实验确定其具体的分子识别机制。总体而言，该传感器在经过预处理的自来水、母猪唾液、全乳及发情后期母猪尿液中均展现出实验室级别的分析可行性。若要将其用于现场检测，还需进一步优化样品处理方法、磁分离技术、膜加载工艺、探针选择性以及便携式荧光检测装置。