酶标仪的检测原理pdf
作者:小编 | 发布时间: 2026-09-22 | 次浏览
酶标仪的检测原理 光是电磁波，波长 100nm～400nm 称为紫外光， 400nm ～780nm 之间的光可被人眼观 察到，大子 780nm 称为红外光。人们只所以能够看到色彩，是因为光照射到物体上被物体 反射回来。 绿色植物之所以是绿色， 是因为植物吸收了光中的红色光谱。 酶标仪测定的原理 是在特定波长下，检测被测物的吸光值。 检测单位： 光通过被检测物， 前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量， 特定波长下， 同一种被 检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。 检测单位用 OD 值表示， OD 是 optical delnsity （光密度）的缩写，表示被检测物吸收 掉的光密度， OD ＝1og （1 ／trans），其中 trans 为检测物的透光值。 根据 Bouger-amberT-beer 法则， OD 值与光强度成下述关系： E＝OD=log Ι0/ 其中Ι E 表示被吸收的光密度， Ι0为在检测物之前的光强度， Ι为从被检测 物出来的光强度。 OD 值由下述公式计算： E＝OD=C× D×E C 为检测物的浓度 D 为检测物的厚度 E 为摩尔因子 在特定波长下测定每一种物质都有其特定的波长， 在此波长下， 此物质能够吸收最多的 光能量。如果选择其它的波长段，就会造成检测结果的不准确。因此，在测定检测物时，我 们选择特定的波长进行检测，称为测量波长。 但是每一种物质对光能量还存在一定的非特异性吸收， 为了消除这种非特异性吸收， 我 们再选取一个参照波长， 以消除这个不准确性。在参照波长下，检测物光的吸收最小。 检测 波长和参照波长的吸光值之差可以消除非特异性吸收。 Anthos 酶标仪检测值计算 仪器中的检测器接收透过被检测物的光能永利集团量，转换成二进位数字信号，最大为 4095 。 仪器定义没有光源下的透光值为 0 ％，没有检测物的透光值为 100 ％。则实际检测中，检测 物的透光值均在 0 ％一 100 ％之间。透光值 的计算如下： T ＝（ Meas— Min ）／（ Max— Min ） 其中 T 为透光值， Meas 为检测的二进位数值， Min 为在 0％的情况下检测的二进位 数值， Max 为在 100 ％的情况下检测的二进位数值，举例如下： MaX=3600 Mn=20 Meas ＝30 T= （30-20 ）/3600-20) ＝0．0028 OD ＝1og （1/T ）=1og （1/0.0028）=2.552 Anthos 酶标仪的中心定位 仪器会自动对酶标孔进行中心定位， 中心定位是要消除酶标孔底的凸凹引起的厚薄不均 带来检测的不准确。在对每一个酶标仪进行检测时，仪器其实要进行 35 个点的测量，选取 最中间的 5 个点的均值为本孔的 OD 值。 光源的参照通道 参照通道是用来校准由于电压不稳或灯泡磨损带来的影响。 酶标仪的用途和其它提示 用于 ELISA 试剂的测定，广泛用于各种实验室，包括临床实验室。 质量控制 质量控制是试剂检测的重要因素。请按照试剂说明书的要求进行质量控制。 空白校正 有一些试剂盒的说阴书将空白孔设置为空气， 其它大多数空白孔的设置是用试剂来设置 的，请按照试剂盒的说明书要求进行。 检测结果的解释 由于有相当多的因素会影响检测的结果， 如不同的酶标板， 检测试剂的体积， 都会造成 OD 值的不，因此，只有使用同一酶标板反应的试剂检测结果才能比较和分析。对结果的临 床解释请依照试剂盒的说明书进行。 酶标仪的使用注意事项 1、工作环境 酶标仪是一种精密的光学仪器， 因此良好的工作环境不仅能确保其准确性和稳定性， 还 能够延长其使用寿命。根据 DIN VDE 0871 条例，仪器应放置在无磁场和干扰电压的位置。 依据 DIN 45 635 －19 条例： 仪器应放置在低于 40 分贝的环境下。 为延缓光学部件的老化，应避免阳光直射。 操作时环境温度应在 15℃－ 40 ℃之间，环境湿度在 15％－ 85 ％之间。 操作电压应保持稳定。 操作环境空气清洁，避免水汽，烟尘。 保持干燥、干净、水平的工作台面，以及足够的操作空间。 2、操作注意事项 酶标仪的功能是用来读取酶联免疫试剂盒的反应结果， 因此要得到准确结果， 试剂盒的 使用必须规范。 许多医院在使用酶标仪之前是通过目测判断结果， 操作过程随意性较大， 在 使用酶标仪后如果不能及时纠正操作习惯， 会造成较大误差。 在酶标仪的操作中应注意以下 事项： 使用加液器加液，加液头不能混用。 洗板要洗干净。如果条件允许，使用洗板机洗板，避免交叉污染。 严格按照试剂盒的说明书操作，反应时间准确。 在测量过程中，请勿碰酶标板，以防酶标板传送时挤伤操作人员的手。 请勿将样品或试剂洒到仪器表面或内部，操作完成后请洗手。 如果使用的样品或试剂具有污染性、毒性和生物学危害，请严
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