每日科技名词——荧光显微镜
作者:小编 | 发布时间: 2026-09-17 | 次浏览

定义:装备有激发光源、暗视野聚光镜和特殊滤光片,用以观察能发射荧光标本的显微镜。
荧光显微镜以紫外线为光源,用以照射被检物体,使之发出荧光,从而在显微镜下观察其形状和位置。荧光显微技术是目前在光镜水平对特定成分进行定量和定位分析最有力的技术之一,常用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。荧光显微镜的工作原理是利用特定的荧光染料或荧光蛋白对标本进行标记,在特永利集团定的激发光下,荧光染料或荧光蛋白会发出特定波长的荧光,通过荧光显微镜的物镜和目镜观察荧光信号,从而形成图像。
荧光显微镜的基本结构包括光学系统、滤色镜系统和机械装置。光学系统包括:光源、聚光镜、物镜和目镜。荧光显微镜的光源通常为高压汞灯,汞灯能以最小的表面发出最大数量的紫外光、蓝光和绿光,光的亮度大且稳定。需要注意的是,汞灯不能频繁启闭,汞灯关闭后不能立刻点亮,须等待15~30分钟,待汞灯冷却后再接通电源。滤色镜系统包括激发滤色镜、吸收滤色镜和分光镜。激发滤色镜为被检样品的荧光染料提供最佳波段的激发光。荧光染料均有适合的吸收光谱,激发滤色镜多为带通滤光片,可允许一段波长的光通过,其他波段的光则被镜片吸收。利用滤色镜对光的选择吸收能力,选用合适的激发滤色镜,能使其透射光谱为荧光染料的最大吸收光谱。吸收滤色镜的主要作用是阻断或吸收光路中的激发光或某些波长较短的光,但样品发射的长波长荧光可以透过。分光镜又称二向色镜,兼有透射长波长光和反射短波长光的功能,起到“分流”作用。机械装置主要由镜座、镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台和调焦装置组成。镜座和镜臂是显微镜的基本骨架,起稳固和支撑的作用;镜筒上端为目镜,下端为物镜转换器。
荧光显微镜按照光路可分为透射式荧光显微镜和反射式荧光显微镜。透射式荧光显微镜的光路是:激发光通过聚光镜后自下而上地透射样品,激发样品荧光物质发出的荧光从物镜前方进入物镜,适用于较薄且透明的样品。反射式荧光显微镜的光路是:激发光由物镜后部进入物镜后向下落射在样品上,荧光物质被激发出荧光,荧光被反射向上再进入物镜,适用于较厚或不透明的样品。